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論文分享|微生物生長(zhǎng)曲線分析儀用于自動(dòng)監(jiān)測(cè)海豚鏈球菌的生長(zhǎng)曲線

發(fā)布時(shí)間:2024-12-09 來(lái)源:新芝生物 瀏覽量:0
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研究摘要

  2022年8月,湖北省宜昌市養(yǎng)魚(yú)場(chǎng)發(fā)生了大規(guī)模黃顙魚(yú)死亡事件,研究人員從患病黃顙魚(yú)體內(nèi)分離出了一株致病菌,并且經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)、生理生化特征以及16S rRNA基因序列和系統(tǒng)發(fā)育分析,將其鑒定為海豚鏈球菌(Streptococcus iniae)。

  通過(guò)對(duì)這株海豚鏈球菌的全基因組測(cè)序,研究人員發(fā)現(xiàn)該菌含有一條長(zhǎng)度為1,776,777? bp的環(huán)狀染色體,GC含量為37.14%?;蚪M序列分析顯示,這株菌具有204個(gè)毒力相關(guān)基因和127個(gè)抗生素耐藥基因。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明,這株海豚鏈球菌具有極高的致病性,半數(shù)致死量(LD50)為9.53?×?105 CFU/g。組織病理學(xué)檢查顯示,感染該菌株后,黃顙魚(yú)的多個(gè)器官如皮膚、鰓、鰭、脾臟、肝臟、腎臟、腸道、眼睛和大腦等部位出現(xiàn)了細(xì)胞大面積變性、壞死、出血和炎癥反應(yīng)。

  感染后,黃顙魚(yú)血清中的酸性磷酸酶和堿性磷酸酶等先天免疫酶活性在24和48小時(shí)后顯著升高,然后在168小時(shí)后降低。此外,研究團(tuán)隊(duì)還在感染后的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)了黃顙魚(yú)體內(nèi)免疫相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄情況,發(fā)現(xiàn)這些基因的轉(zhuǎn)錄水平顯著上調(diào),這表明宿主體內(nèi)的免疫系統(tǒng)在抵抗海豚鏈球菌感染的過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。

  此次研究不僅明確了海豚鏈球菌是導(dǎo)致黃顙魚(yú)大規(guī)模死亡的直接原因,還提高對(duì)海豚鏈球菌入侵的致病機(jī)制和宿主防御系統(tǒng)的認(rèn)識(shí),為后續(xù)的疾病防控工作提供了重要的理論依據(jù)。

MGC系列微生物生長(zhǎng)曲線分析儀的應(yīng)用

  為了更好地理解海豚鏈球菌的生長(zhǎng)特性,研究團(tuán)隊(duì)使用了MGC系列微生物生長(zhǎng)曲線分析儀MGC-200來(lái)自動(dòng)檢測(cè)生長(zhǎng)曲線。

  將海豚鏈球菌在BHI培養(yǎng)基中培養(yǎng)至OD600達(dá)到1.0后,將菌液以1:100的比例接種到不同pH值(5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0和8.5)和不同NaCl濃度(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%和3.0%)的BHI培養(yǎng)基中,在96孔板中培養(yǎng)(每孔200μL),每2小時(shí)檢測(cè)一次OD600,共培養(yǎng)60小時(shí)。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

  如圖A所示,分離得到的這株海豚鏈球菌在pH 6.5~7.5之間生長(zhǎng)最佳,最適pH約為7左右。當(dāng)pH為6.0時(shí),細(xì)菌生長(zhǎng)遲滯期有所延長(zhǎng),當(dāng)pH為5.5時(shí),細(xì)菌生長(zhǎng)遲滯期明顯延長(zhǎng),當(dāng)pH為8.5時(shí),細(xì)菌的生長(zhǎng)受到了抑制。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

  由圖B可知,分離得到的這株海豚鏈球菌在0.5~1.5% NaCl濃度下均能正常生長(zhǎng),最適NaCl濃度為1.0,當(dāng)NaCl濃度達(dá)到2.0%時(shí),細(xì)菌生長(zhǎng)遲滯期明顯延長(zhǎng),當(dāng)NaCl濃度達(dá)到3.0%時(shí),細(xì)菌生長(zhǎng)停止。

結(jié)論

  MGC系列微生物生長(zhǎng)曲線分析儀具有氣體環(huán)境監(jiān)控、高通量培養(yǎng)、全自動(dòng)檢測(cè)以及實(shí)時(shí)顯示生長(zhǎng)曲線等的功能,整個(gè)過(guò)程無(wú)需人工頻繁取樣,也無(wú)需人員值守,大大降低了污染風(fēng)險(xiǎn),真正實(shí)現(xiàn)了人力的解放和研究效率的提升,將成為您科研路上的得力助手。

微生物生長(zhǎng)曲線分析儀

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